RecE-independent instability in Bacillus subtilis
RecE-независимая нестабильность у Bacillus subtilis

I. S. Karpova, O. V. Pidpala
1991 Biopolymers and Cell  
RecE-НЕЗАВИСИМАЯ НЕСТАБИЛЬНОСТЬ У BACILLUS SUBTILIS Продолжено изучение необычной транспозируемой мутации сенной палочки, нестабильность которой проявляется в сочетании крайне высокой ревертабельности по аланину с частым возникновением мутаций в нескольких новых позициях. Введение с помощью трансформации в геном исследуемого мутанта маркера гесЕ4 не привело к снижению его мутабильности. Очевидно, реализация нестабильности не зависит от системы общей рекомбинации. Введение. Предшествующими
more » ... ми было показано, что добавление эукариотической ДНК (сельди) в компетентную культуру сенной палочки приводит к возникновению многочисленных мутаций. У ряда мутантов наблюдалась продленная генетическая нестабильность, частые (до 50 %) реверсии, а также транспозиции, стимулируемые повышенной температурой [1-3]. Необычные свойства мутантов напоминали примеры природной генетической нестабильности, вызываемой мобильными элементами генома [4] [5] [6] . Описаны случаи, когда генетическая нестабильность у бактерий была следствием дупликации определенного сегмента хромосомы и последовавших за этим рекомбинационных событий между двумя гомологичными участками ДНК [7, 8] . Вместе с тем перемещение мобильных генетических элементов происходит по механизмам, независимым от системы общей рекомбинации, основанной на взаимодействии гомологичных нуклеотидных последовательностей [9] [10] [11] [12] . Главная особенность исследуемой нами нестабильной системы (изучено подробно на примере ревертабельной ауксотрофной мутации по лейцину Leu5-3) состоит в ее способности «эволюционировать» в сторону изменения и усложнения проявлений нестабильности [3, 13] . Это может свидетельствовать о внутренней реорганизации наследственного материала, в частности о возникновении дупликаций. С другой стороны, транспозитивность мутации Leu5-3 косвенно указывает на присутствие транспозоноподобного элемента. Для выяснения природы найденного явления нестабильности представлялось принципиальным решить вопрос о зависимости свойств данной системы генетической нестабильности от функционирования основного гена, ответственного за рекомбинационные процессы у сенной палочки -гена гесЕ [14] . Продукт этого гена у сенной палочки является аналогом ЯесА-белка кишечной палочки [14] . Поскольку невозможна прямая селекция г£с-мутации, проявляющейся по чувствительности к антибиотику митоцину С (mit s ), в геном штамма BD224 дополнительно ввели селектируемый маркер, обусловливающий устойчивость к нейтральному в отношении процессов рекомбинации антибиотику -рифампицину (rif r ). С этой целью неразведенную взвесь клеток высеяли на чашку с полноценной средой, содержащей градиент концентрации рифампицина, и отобрали несколько колоний, устойчивых к антибиотику (3 мкг/мл). Из рифампицинустой-© и. С. КАРПОВА, О. В. ПИДПАЛА, 1991
doi:10.7124/bc.0002bd fatcat:j6vzq56wuva3niaf3vw2ve6l4u