Vergleich verschiedener Kulturbedingungen für die Differenzierung leukämischer Blasten zu dendritischen Zellen
[thesis]
Sina Süßmilch, Universitätsbibliothek Der FU Berlin, Universitätsbibliothek Der FU Berlin
2011
Dendritische Zellen (DC) können als fähigste antigenpräsentierende Zellen des Immunsystems für eine Immuntherapie gegen onkologische Erkrankungen wie die Leukämien dienen. Sie lassen sich in vitro direkt aus leukämischen Blasten differenzieren und bieten damit die Möglichkeit, dem Immunsystem alle tumorassoziierten Antigene präsentieren zu können. Trotz der Vielzahl veröffentlichter Generierungsprotokolle bleiben Fragen zur optimalen Präparation der Zellen sowie der Applikationsart im Rahmen
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... er klinischen Studie unbeantwortet. In der vorliegenden Arbeit konnte nachgewiesen werden, dass die Verwendung von Humanserum und der Zusatz von fetalem Kälberserum äquivalent sind für die Differenzierung von DC aus leukämischen Blasten. Da tierische Seren die Risiken allergischer Reaktionen sowie der Übertragung von Infektionen wie der bovinen spongiformen Enzephalopathie bergen, ist die Verwendung rein humaner Komponenten für den klinischen Einsatz der differenzierten Zellen von Bedeutung. Des Weiteren erwies sich das aus rein humanen Komponenten bestehende Medium QBSF 60 als dem Standardmedium RPMI 1640 gleichwertig für die Differenzierung leukämischer Blasten zu DC. Anders als QBSF 60 ist RPMI 1640 nicht für die klinische Anwendung zugelassen, womit eine weitere Hürde für den klinischen Einsatz der DC genommen wurde. Sowohl aus den Blasten der 16 verschiedenen AML- als auch der 21 verschiedenen ALL- Patienten konnten morphologisch reife und vitale DC differenziert werden, die die typischen zytoplasmatischen Zellfortsätze tragen. Es zeigte sich in allen getesteten Kulturkonditionen eine signifikante Expressionssteigerung der für reife DC typischen Oberflächenmoleküle CD83 und HLA-DR. In der gemischten Lymphozytenkultur konnte ihre Fähigkeit, allogene T-Lymphozyten zu aktivieren nachgewiesen werden. Die Zugabe von IL-3 und IL-4 zu der Zytokinkombination bestehend aus TNFα, GM-CSF, SCF und Flt-3L erbrachte keine Vorteile für die Differenzierung der AML-Blasten zu DC. Aus diesem Grund kann auf beide Interleukine verzichtet [...]
doi:10.17169/refubium-5245
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