CONFRONTO TRA DUE METODICHE PER LA RILEVAZIONE DELLA FARMACO-RESISTENZA IN M.TUBERCULOSIS COMPLEX

S. Romano, M. Bernassola, M.C. Cava, G. Cappiello, R. Longo, M. Visca, C.L. Bonanno, A. Spanò
2006 Microbiologia Medica  
Introduzione. L. pneumophila è responsabile della legionellosi, una malattia infettiva che presenta differenti quadri clinici, quali la Malattia dei Legionari e la Febbre di Pontiac. Le infezioni da Legionella sono considerate un problema epidemiologicamente rilevante in Sanità Pubblica per la capacità di questo batterio di infiltrarsi nei sistemi di distribuzione dell'acqua; tutto ciò richiede un monitoraggio continuo soprattutto in ambienti comunitari, quali ospedali, alberghi ed altri tipi
more » ... strutture ricettive. Scopo del presente studio è stato quello di mettere a punto un test in PCR-real time e di compararlo al metodo colturale (che ad oggi rappresenta ancora il "gold standard") per l'identificazione di Legionella in campioni di acqua per uso domestico ed in ambienti comunitari. Metodi. Sono stati analizzati 201 campioni di acqua provenienti da hotel, residence e ospedali presso l'U.O. di Microbiologia Clinica, Università degli Studi "Magna Graecia" di Catanzaro (Centro Regionale per la Diagnosi di Legionellosi per la Calabria), in un periodo compreso tra giugno 2005/dicembre 2005. Due tecniche di arricchimento del campione (filtrazione e centrifugazione) e due tecniche di estrazione del DNA (manuale ed in automatico) sono state comparate. Per valutare la presenza dei geni di Legionella genere-specifico (16S rRNA) e specie-specifico (mip) in PCR real-time, è stata utilizzata la colorazione SYBR Green in associazione allo strumento LightCycler (Roche Diagnostics, Italy). Risultati. I risultati ottenuti dopo filtrazione del campione ed estrazione in automatico del DNA, mostravano un aumento della sensibilità del 3% rispetto al metodo colturale. Conclusioni. L'associazione tra arricchimento per filtrazione, estrazione del DNA eseguita in automatico e PCR realtime costituisce una procedura ottimale che è in grado di fornire dati paragonabili a quelli ottenuti con il metodo colturale, riducendo i tempi di esecuzione e di refertazione.
doi:10.4081/mm.2006.3129 fatcat:6lmpnebxfrbhjf62wmici3iy2q