Stabilization of the Substrate Reaction of Horseradish Peroxidase with o-Phenylenediamine in the Enzyme Immunoassay

T. Porstmann, Bärbel Porstmann, R. Wietschke, R. von Baehr, E. Egger
1985 Clinical Chemistry and Laboratory Medicine  
When the horseradish peroxidase reaction is stopped with acid, the decay of unconverted hydrogen peroxide is responsible for the further oxidation of o-phenylenediamine. This leads to a time-dependent ilattening of the Standard curve in the enzyme immunoassay, after the reaction has been stopped. Addition of reducing agents, such äs sulphite ions, to the stopping solution, prevents the further oxidation of 0-phenylenediamine by completely reducing the remaining hydrogen peroxide. The developed
more » ... olour is then stabilized. Stabilisierung der Substratreaktion mit o-Phenylendiamin und Wasserstoffperoxid für Meerrettich-Peroxidase im Enzymimmunoassay Zusammenfassung: Nach Abbruch der Peroxidasereaktion durch Säurezugabe führt der Zerfall von nicht umgesetztem Wasserstoffperoxid zur weiteren Oxidation von o-Phenylendiamin, was zu einer Abflachung der Standardkurven im Enzymimmunoassay mit zunehmender Zeit nach Reaktionsabbruch führt. Der Zusatz von Reduktionsmitteln wie beispielsweise Sulfitionen zur Stopplösung verhindert durch Reduktion des verbliebenen Wasserstoffperoxids die weitere Oxidation von 0-Phenylendiamin und stabilisiert die entwickelte Farbe.
doi:10.1515/cclm.1985.23.1.41 fatcat:u7y3tvh5jzczxazn7lzjhbzqam