Vergleich der Ergebnisse der ionenaustauschchromatographischen und der enzymatischen Bestimmung des Glutamingehaltes menschlichen Serums
K. BEYERMANN, K. WEISE
1970
Clinical Chemistry and Laboratory Medicine
Die ionenaustauschchromatographische Bestimmung des Glutamins nach ORESKES wird variiert. Es wird bei 30° an einer 125 cm langen Säule von 0,6 cm Durchmesser mit Chromobead, Typ B, bei pH 2,88 (Citratpuffer) chromatographiert. Ein Puffergradient ist zur Trennung von Glutamin und Asparagin nicht nötig. 40 Glutamin werden mit einer Ausbeute von 87% mit einem Variationskoeffeienten von 3% (n = 6) wiedergefunden. Zur enzymatischen Bestimmung eignet sich die Glutaminase der Fa. Worthington. Durch
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... zentrieren enteiweißte Serumproben werden bei 39° 30 Min. lang bei pH 4,8 mit 0,5 mg Enzym inkubiert. Das in Freiheit gesetzte Ammoniak wird abdestilliert und durch coulom etrische Titration bestimmt. 40 g Glutamin sind mit einem Variationskoeffizient von 5% (n = 20) bestimmbar. Bei der Analyse von Serumproben von 25 Gesunden und 15 Leberkranken ergeben beide Verfahren innerhalb ihrer Fehlergrenzen übereinstimmende Ergebnisse. Der Glutamingehalt des Serums von Normalpersonen beträgt im Mittel 8,4 mg/100 m/. Der Mittelwert schwankt mit einer Standardabweichung von 1,2 mg/100 m/. Bei Leberkranken wird ein Mittelwert von 10,1 mg/100 m/ gefunden. Die Standardabweichung beträgt 1,1 mg/100 m/. A comparison of results from the determination of glutamlne In human serum en^ymlcally and by Ion exchange chromatography The ion exchange method of ORESKES for the Chromatographie determination of glutamine was modified. Chromatography is performed at 30° on a column of chromobead, type B, length 126 cm, diam. 0.6 cm. with citrate buffer, pH 2.88. A buffer gradient is not necessary to separate glutamine and aspargine. 40 % of glutamine gave a recovery of 87% with a variation coefficient of 3% (6 experiments). Glutaminase from Worthington was used for the enzymic assay. Serum samples, deproteinised by ultrafiltration were incubated at pH 4.9 for 30 min. at 39°, with 0.5 mg enzyme. The released ammonia was removed by distillation and measured by coulometric tritration. 40 § of glutamine can be determined with a variation coefficient of 5% (20 experiments). In the analysis of serum samples from 25 healthy persons and 15 with illnesses of the liver, the results from the two methods were in agreement within their limits of error. The average glutamine content for normal serum is 8.4 mg/100 m/. The mean value shows a standard deviation of 1.2 mg/100 m/. In liver patients, the average value was 10.1 mg/100 m/, with a standard deviation of 1.1 mg/100 m/.
doi:10.1515/cclm.1970.8.3.314
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