Development of an electrochemical immunosensor for Phakopsora pachyrhizi detection in the early diagnosis of soybean rust

R. K. Mendes, D. C. M. Ferreira, R. F. Carvalhal, L. A. Peroni, D. R. Stach-Machado, L. T. Kubota
2009 Journal of the Brazilian Chemical Society  
A ferrugem da soja é uma doença que ocorre nas folhas da soja e é considerada muito agressiva, pois reduz a qualidade do grão final. A identificação precoce do fungo na plantação previne várias perdas para o agricultor bem como para as culturas vizinhas. Neste trabalho, um imunossensor foi desenvolvido sem a utilização de marcadores usando medidas de impedância para detectar a ferrugem asiática nos extratos das folhas contaminadas nos estágios iniciais da doença, antes do aparecimento dos
more » ... as. O anticorpo anti-micélio do fungo Phakopsora pachyrhizi (agente causador da doença) foi imobilizado em substrato de ouro via formação de monocamadas autoorganizadas de tióis e ligações covalentes com a biomolécula. O imunossensor apresentou um limite de detecção de 385 ng mL -1 . A otimização das condições experimentais e o bloqueio da superfície para minimizar ligações não-específicas foram realizados. Este estudo proporcionou uma nova perspectiva da utilização do método para o diagnóstico precoce da doença. Soybean rust is a disease that occurs on soybean leaves and is considered very aggressive, reducing product quality. Early identification of fungus in the plants prevents severe farming losses as well as spreading to neighboring cultures. In this paper, a label-free immunosensor was developed based on impedance measurements to detect Asian rust on soybean leaf extract at the early stages of the disease. The antibody anti-mycelium of Phakopsora pachyrhizi fungus (disease agent) was immobilized on a gold substrate via a self-assembled monolayer (SAM) of thiols using covalent cysteamine coupling. This immunosensor presents a limit of detection of 385 ng mL -1 . The optimization of experimental conditions and surface blocking to minimize non-specific adsorption on the immunosensor response were evaluated. These studies, based on electrochemical impedance spectroscopy (EIS), provide new perspectives on using this method for early diagnosis of soybean rust. Development of an Electrochemical Immunosensor for Phakopsora pachyrhizi J. Braz. Chem. Soc. 796
doi:10.1590/s0103-50532009000400023 fatcat:cosxcffftngo5a3cqjgxfrjxdq