6 Ergebnisse II: Heterologe Expression einer artifiziellen, dimodularen Peptidsynthetase in B. subtilis KE30 86 6.1 Strategie 86 Inhaltsverzeichnis IV 6.2 Der heterologe Wirt B. subtilis KE30 86 6.3 Konstruktion der E. coli / B. subtilis Expressionsvektoren 87 6.4 Überproduktion der artifiziellen, dimodularen Hybridsynthetase C srfA-A1 -(A Asp -PCP-C-A Leu -PCP) srfA-B2-3 (-His 6 ) in E. coli und B. subtilis 90 6.5 Biochemische Charakterisierung der rekombinanten, dimodularen Peptidsynthetasen

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... 2 7 Ergebnisse III: Heterologe Expression des vollständigen Bacitracin-Biosynthese-Genklusters in B. subtilis 95 7.1 Strategie 95 7.2 Integration des 49kb-umfassenden Bacitracin-Biosynthese-Genklusters in die ehemalige srfA-Region von B. subtilis 96 7.2.1 Integration von bacT und bacA in B. subtilis KE30 97 7.2.2 Reinigung und biochemische Charakterisierung von BacA aus B. subtilis KE320 99 7.2.3 Integration von bacB, bacC und bcrABC in B. subtilis KE320 101 7.2.4 Rekonstitution des Zwei-Komponentensystems bacRS 102 7.2.5 Heterologe Produktion des Peptidantibiotikums Bacitracin in B. subtilis KE360 104 7.2.6 Bacitracin-Resistenz in B. subtilis KE360 107 8 Diskussion 108 8.