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... CLÍNICO CONTROLADO E RANDOMIZADO Tese apresentada à Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo, para obtenção do título de Doutor em Odontologia (Periodontia). Área de concentração: Periodontia Orientador: Prof. Dr. Sérgio Luís Scombatti de Souza RIBEIRÃO PRETO 2012 AUTORIZO A REPRODUÇÃO E DIVULGAÇÃO DO TEOR TOTAL OU PARCIAL DESTE TRABALHO, POR QUALQUER MEIO CONVENCIONAL OU ELETRÔNICO, PARA FINS DE ESTUDO E PESQUISA, DESDE QUE CITADA A FONTE. Ficha catalográfica elaborada pela Biblioteca Central do Campus USP -Ribeirão Preto Queiroz, Adriana Corrêa de Avaliação do efeito adjunto da terapia fotodinâmica antimicrobiana aos procedimentos de raspagem e alisamento radicular em pacientes fumantes. Estudo clínico controlado e randomizado. Ribeirão Preto, 2012. Agradecimentos A Deus, força maior que me guiou e abençoou minhas escolhas. À minha família, marido, pais, irmãs, primo-irmão Mauro, cunhados, sogros, primos e tios, pela torcida e apoio. Em especial, ao meu orientador, Sérgio Luís Scombatti de Souza, pela oportunidade de crescimento pessoal e profissional e pelos conhecimentos adquiridos durante o desenvolvimento deste e de outros projetos. E, principalmente, por ter permitido que eu iniciasse minha carreira acadêmica antes do previsto e pela paciência em me orientar à distância em muitos momentos. Ao coordenador do curso de Pós-graduação em Periodontia, Arthur Belém Novaes Júnior, pelo exemplo de pesquisador que representa pra mim, pelas oportunidades em diversos projetos e por ter permitido que eu pudesse conciliar minhas funções na UFAM com o término do curso. Aos professores do curso de Periodontia Márcio Grisi, Mário Taba Júnior e Daniela Bazan Palioto, por tudo que aprendi durante os seis anos de convívio. À minha amiga e dupla, Flávia Adelino Suaid, que participou todas as fases deste projeto, realizando etapas indispensáveis para que todos os dados necessários pudessem ser obtidos após o momento em que tive que retornar para Manaus. Sua competência e dedicação permitiram que eu concluísse essa fase da minha vida e serei sempre grata por isso. À amiga Patrícia Freitas de Andrade, pela concepção inicial do projeto. Aos pacientes participantes, que permitiram que seu tratamento fosse aplicado para o desenvolvimento científico. À Fabíola Singaretti Oliveira, pela paciência e apoio na realização dos testes ELISA. E à Izilvânia e demais profissionais da UNG pela recepção e realização dos exames microbiológicos. À Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo. À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo -FAPESP, pelo apoio financeiro para a realização do estudo. Maria Augusta Bessa Rebelo, pela amizade e carinho desde os tempos de graduação e apoio incondicional para que eu cumprisse minhas obrigações no doutorado. À ex-Coordenadora Acadêmica e atual diretora da FAO-UFAM, Nikeila Chacon de Oliveira Conde, que tornou possíveis minhas constantes idas a Ribeirão Preto, sempre me dando todo carinho e apoio de que precisei. À professora de Periodontia da UFAM, Miriam Raquel Ardigó Westphal, que me apoiou durantes minhas ausências para a conclusão do projeto. E às professoras Suellen Lima e Cristiane Bochi, pela contribuição nesse período. A todos os professores que contribuíram para minha formação. Às amigas Priscila Paganini, Flávia e Luciana, minha turma querida de doutorado, companhias em todos os momentos, amizades que ficarão distantes, mas serão reais. E às amigas de mestrado, a quem não poderia deixar de agradecer por serem tão presentes na minha vida de pós-graduação e de quem sinto muitas saudades, Priscila Nóbrega, Germana e Anne. Aos amigos e colegas de pós-graduação, Guilherme, Raquel, Patrícia Freitas, Luciana Maia e Patrícia Garani, tão presentes em momentos de amizade e de desenvolvimento de pesquisas. E a todos os demais colegas de tantas turmas de mestrado e doutorado. Aos meus queridos alunos. Ter iniciado minha carreira docente ainda durante o curso trouxe um novo sentido, muito mais completo e claro, para minha vida acadêmica. Minha dedicação e empenho não têm mais uma conotação individual. Crescemos juntos! Obrigada por tornarem meu exercício diário tão especial! A todos os funcionários da FORP por todo carinho e disponibilidade, especialmente Tatiana, Dulce, Adriana, Suely, Zilda, Isabel e Regiane. A todos que contribuíram para a realização deste trabalho. Resumo QUEIROZ, AC. Avaliação do efeito adjunto da terapia fotodinâmica antimicrobiana aos procedimentos de raspagem e alisamento radicular em pacientes fumantes. Estudo clínico controlado e randomizado. 2012. 107 p. Tese (Doutorado em Periodontia) -Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2012. parâmetros clínicos em pacientes fumantes. Contudo, a TFDa foi capaz de reduzir significativamente a concentração de IL-1β (no exame de uma semana) e MMP-8 (no exame de 12 semanas), sugerindo uma possível vantagem na cicatrização periodontal. Isso não foi confirmado, no entanto, pela analise microbiológica, que mostrou que nenhum dos tratamentos reduziu significamente os níveis bacterianos. Abstract QUEIROZ, AC. The adjunctive effect of antimicrobial photodynamic therapy to nonsurgical periodontal treatment in smokers: a randomized clinical trial. 2012. 107 p. Tese (Doutorado em Periodontia) -Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2012 Periodontitis is caused by pathogenic bacteria and it can be successfully treated by procedures that include oral hygiene instructions, elimination of plaque retentive factors and scaling and root planing (SRP) alone or in combination with periodontal surgery. The literature has reported that smokers present a poorer response to conventional periodontal treatment when compared with nonsmoking patients. Thus, it is appropriate to evaluate adjunctive therapies to conventional treatment of scaling and root planing (SRP) in these patients. In vitro and in vivo studies have demonstrated the potential of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) against periodontopathic bacteria. Thus, this study aimed to analyze the adjunctive action of aPDT to SRP in smokers with chronic periodontitis. We selected 20 smokers with chronic periodontitis, presenting a pair of contralateral teeth with bleeding on probing and probing depth greater than or equal to 5 mm. Each pair of teeth was randomly alocated on control group (CG), in which SRP was performed, and on test group (TG), in which PDT was performed in addition to SRP. Clinical parameters of plaque index (PI), bleeding on probing (BOP), probing depth (PD), relative clinical attachment level (CAL), gingival recession (GR) were recorded at the baseline and 4 and 12 weeks after periodontal treatment. Moreover, at baseline and 1, 4 and 12 weeks after periodontal treatment, subgingival plaque samples were collected for identification and quantification of periodontopathic bacteria using Checkerboard DNA-DNA hybridization technique, as well as gingival crevicular fluid (GCF) samples for quantification of Interleukin-1 beta (IL-1β) and metalloproteinase 8 (MMP-8) using ELISA. There was a statistically significant reduction in PD (GT-1.81 ± 0.52 mm / GC-1.58 ± 1.28 mm, p <0.001) and a statistically significant gain in CAL (GT-1.60 ± 0, 92 mm / GC-1.41 ± 1.58 mm, p <0.001) for both groups. Statistically significant differences were not observed in comparisons between groups. The concentration of IL-1β in GCF was higher in GC in the examinations performed 1 week after periodontal treatment (GT-24, 65 ± 18.85 pg / µL / GC-34, 07 ± 24.81 pg / µL, p = 0.048) and MMP-8 was also higher in GC 12 weeks after periodontal treatment (GT-303, 31 ± 331.62 pg / µL / CG-534, 23 ± 647.37 pg / µL, p = 0.024). There was no statistically significant differences in the intra-groups analyses. The 40 bacterial species tested were detected at different levels at baseline, with no statistically significant differences between groups. After periodontal treatment, the level of some bacterial species had decreased while others presented an increasing. Despite this variation, statistical analysis was not able to identify statistically significant differences in comparisons within and between groups. Thus, the present study failed to demonstrate that the adjunctive effect of a single episode of aPDT to SRP improves clinical parameters in smokers. However, it resulted in a significantly suppression of IL-1β and of MMP-8, suggesting an advantage on periodontal healing. This has not been confirmed, on the other hand, by the microbiological analysis, which showed that none of the treatments was able to significantly reduce the bacteria levels.