Dedico este trabalho aos meus pais, à meu namorado, pelo apoio incondicional, e a todos meus amigos e colegas de pós-graduação. AGRADECIMENTOS Primeiramente agradeço a Deus pelo dom da vida, e pelas oportunidades que me foram concedidas. Aos meus pais Elizabeth e Juliano, e a minha irmã, pelo amor incondicional e pela paciência, acreditando e respeitando minhas decisões e nunca deixando que as dificuldades acabassem com os meus sonhos, serei imensamente grata. Ao meu namorado Lucas pelo eterno

more »

... ompanheirismo, incentivo, carinho e apoio, e colaboração para que esse trabalho fosse realizado. E aos meus sogros Vergilio e Elenice pelo apoio. A minha família que sempre me apoiou e acreditou em meus sonhos. Agradeço ao Programa de Biociências Aplicadas à Farmácia da Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo pela oportunidade de realizar o curso de mestrado. Agradeço a querida orientadora Profa. Dra. Eliana Guedes Stehling pelo apoio, paciência, confiança e excelência na minha formação técnica e intelectual. A todos os amigos do Farmacêuticas de Ribeirão Preto, pela colaboração e auxílio nos experimentos. A equipe do Laboratório de Química Analítica do Professor Norberto Peporine Lopes, em especial a Anelize pela colaboração e auxílio nos experimentos finais. A todos os amigos e amigas de longa data pelo companheirismo e amizade. A todos os professores do Centro Universitário Barão de Mauá que me proporcionaram uma ótima formação para que eu pudesse realizar com sucesso mais essa etapa. Agradeço aos órgãos de fomento à pesquisa CAPES e FAPESP, que financiaram a bolsa e todos os materiais e equipamentos necessários para realização desse trabalho. Agradeço a todos que contribuíram com a minha formação. ii importância, visto que os herbicidas alteram significativamente a heterogeneidade da comunidade bacteriana do solo. Palavras-chave: DGGE; Pesticidas; Genes catabólicos iii ABSTRACT MORETTO, J. A. S. Investigation of the influence of different pesticides in the soil microbiota. 2015. 69f. Dissertation (Master´s Degree). School of Pharmaceutical Sciences of Ribeirão Preto -University of São Paulo, Ribeirão Preto, 2015. The use of pesticides to eradicate pests and weeds resulted in increased agricultural production worldwide, however, led to concern about the environmental, social and economic impacts of this practice. Native soil microbiota is very important to maintain the quality of the environment, but with the intensive use of agrochemicals, changes in microbial biomass and formation of large quantities of toxic waste have been observed. This study aimed to evaluate the genetic potential of cultivable and non-cultivable soil fractions to degradate three different herbicides, to verify if the selective pressure exerted by the presence of a particular herbicide has the potential to change the composition of the local microbiota and to identify the main cultivable soil bacterial genera carrying these herbicides degradation genes. For this, six soil samples from different Brazilian regions were used, which were obtained from the state of São Paulo and from environmental preservation areas in the states of Amazonas and Goiás. The main bacterial genera identified in the soil microbiota were: Acinetobacter, Bacillus, Enterobacter, Escherichia, Leclercia, Lysinibacillus, Klebsiella and Staphylococcus, and variations in cultivable and non-cultivable soil fractions genetic potential to degrade various herbicides were observed. Some of these strains harbored genes for degradation of two herbicides (2,4-D and diuron; atrazine and diuron) and other isolates showed genetic potential to degrade one of the three herbicides. Furthermore, analysis with HPLC-MS showed that some bacteria carrying the diuron degradation genes (puhA and puhB) presented formation of metabolites already described in the literature, such DCPMU, DCPU and DCA, and metabolites that have not been described in the literature. By electrophoresis analysis on denaturing gradient (DGGE), was observed that the selective pressure exerted by the presence of these herbicides alters the composition of the local microbiota, being atrazine the herbicide that most affected the bacterial community in the soil. Therefore, the study of the influence of the selective pressure caused by the use of herbicides in the microbial diversity is very important, since herbicides significantly alter the heterogeneity of the soil bacterial community.