Die Etablierung des CRISPR/Cas9-Systems in humanen induzierten pluripotenten Stammzellen zur Untersuchung der Funktion des Kanalproteins Connexin 43 in der Embryonalentwicklung [thesis]

Helena Dambacher
2021
Wiedenheft et al. 2011b) . Dabei lagert sich der crRNA:tracrRNA Komplex über die crRNA komplementär an die eindringende fremde DNA an (Abbildung 2). Cas9 erkennt dabei eine bestimmte Sequenz auf der Fremd-DNA, nämlich die PAM-Sequenz (protospacer adjacent motif) (Sternberg et al. 2014). Diese stellt für Cas9 des Streptococcus pyogenes (SpCas9) die Sequenz 5'-NGG-3' dar (Kleinstiver et al. 2015). Hier folgt (von 5' zu 3') einem beliebigen Nukleotid zwei Mal die Purinbase Guanin. Abbildung 1: Das
more » ... CRISPR/Cas-System. Das CRISPR/Cas-System als Abwehr gegen fremde DNA. Für die Abwehr ist das Zusammenspiel von crRNAs und Cas -Proteinen verantwortlich. Die unterschiedlich fungierenden Cas-Gene sind farblich markiert: Erfassung und Einbau von Spacern (Teile der Fremd -DNA) (gelb), Verarbeitung der crRNA (pink), crRNA Zusammensetzung (blau), Abbau der Fremd -DNA (lila). In grau sind die beteiligten Komponenten dargestellt, die nicht zu den Cas-Proteinen gehören (van der Oost et al. 2014) .
doi:10.25972/opus-24015 fatcat:o3qwr3thzzhqtkz3unhxylkir4