RESUMEN. El congelamiento de espermatozoides es una técnica utilizada en acuicultura que permite almacenar los excedentes que fueron obtenidos durante la época reproductiva, para utilizarlos posteriormente. El proceso de criopreservación, requiere disminuir la temperatura gradualmente y de manera controlada para minimizar los daños ocasionados por el choque osmótico o por formación de cristales de hielo, lo cual es difícil lograr en terreno donde no se dispone de un equipo automático para

more »

... arlo. Este estudio presenta un dispositivo manual portátil que permite descender gradualmente la temperatura, permitiendo repetir en forma exacta cada uno de los protocolos cada vez que se requiera. El equipo consta de un termo Dewar para nitrógeno líquido, un sistema de poleas graduadas, una placa porta-muestras de acrílico y un termómetro para bajas temperaturas. Para verificar su eficiencia, se procedió a criopreservar trozos de la parte masculina de la gónada de Argopecten purpuratus a diferentes tasas de congelamiento (1,1; 2,2; 4,6; 6,5; 8,8; 12,9; 19,2; 32,2 y 96,5ºC·min -1 ). Se utilizó una solución crioprotectora compuesta por leche descremada liofilizada, ME 2 SO y sucrosa a una tasa de descongelamiento de 573ºC·min -1 . La tasa óptima de congelamiento fue de 8,8ºC·min -1 , con la cual se obtuvo 51,3 ± 6,6% de espermatozoides móviles. El congelador mecánico mostró ser eficiente para la criopreservación de espermatozoides de A. purpuratus a diferentes tasas de congelamiento, ya que permitió regular el descenso de las muestras en los vapores de nitrógeno líquido a diferentes velocidades. Palabras clave: espermatozoide, criopreservación, ostión, Argopecten purpuratus, congelador mecánico. Freezing of spermatozoa of the scallop Argopecten purpuratus using a mechanical freezing system ABSTRACT. The freezing of spermatozoa is a technique used in aquaculture which permits the storage of excess spermatozoa from natural or induced spawning, and saves them for use in subsequent procedures. The cryopreservation process requires gradual, controlled lowering of temperature in order to reduce osmotic shock injury or ice crystal formation in the cells. This is difficult to accomplish in the field, where appropriate automatic equipment is not available. This study describes a portable manually operated device usable for accurately repeating required freezing protocols. The device includes a Dewar container for liquid nitrogen, a system of graduated pulleys, an acrylic sample carrier, and a low temperature thermocouple. To test the freezing system, pieces of male gonad of the scallop Argopecten purpuratus were frozen at different rates (1.1, 2.2, 4.6, 6.5, 8.8, 12.9, 19.2, 32.2 and 96.5ºC·min -1 ). The cryoprotective mixture used was composed of lyophilized skim milk, ME 2 SO, and sucrose, with a thawing rate of 573ºC·min -1 . The optimum freezing rate was 8.8ºC·min -1 , obtaining 51.3 ± 6.6% motile sperm. The mechanical freezer was efficient in cryopreservation of A.purpuratus spermatozoa at different freezing rates, since it permitted regulation of the lowering of the samples into the liquid nitrogen vapor at different speeds.