NB1/CD177/HNA-2 ist ein GPI verankertes Protein, welches auf neutrophilen Granulozyten exprimiert wird. 3 – 5 % aller Kaukasier sind CD177 defizient. CD177 negative Individuen neigen zur Alloantikörperbildung. Alloantikörper gegen CD177 können zwei Krankheitsbilder hervorrufen: Die Transfusion von antikörperhaltigem Plasma kann eine transfusions-assoziierte akute Lungeninsuffizienz (TRALI) auslösen. Während einer Schwangerschaft können Anti-CD177 Antikörper durch Transfer der mütterlichen

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... rper in die fetale Zirkulation eine neonatale Alloimmunneutropenie auslösen. Die genetische Grundlage des CD177 Null Phänotyps ist unvollständig aufgeklärt. Eine genetische Variante (c.787A>T), die für ein Stop-Codon kodiert, ist bei einem Teil der Personen mit CD177 Null Phänotyp in homozygoter Anlage nachweisbar. Heterozygote Personen (CD177:c.[787A];[787T]) können ebenfalls einen CD177 Null Phänotyp aufweisen, dessen genetische Grundlage bisher unbekannt ist. Ziele der vorliegenden Arbeit waren: 1) die Resequenzierung des CD177 Gens bei Personen mit CD177 negativem Phänotyp, um bisher nicht bekannte genetische Ursachen des CD177 Null Phänotyps zu identifizieren; 2) die Identifikation möglicher neuer Isoformen von CD177; 3) die Expression der Protein-Isoform durch transiente Transfektion von Zellen; 4) die Etablierung eines RT-PCR Tests zum Nachweis der neu entdeckten Isoform auf mRNA Ebene. Als Methoden wurden unter anderem die Durchflusszytometrie, Granulozytenisolation, next generation sequencing, Sanger Sequenzierung, PCR, ortsspezifische Mutagenese, Zellkultur, Western Blot und Immunpräzipitation durchgeführt. Im Rahmen des Spenderscreenings wurden 3 CD177 negative Spender identifiziert. Im anschließenden next generation sequencing des CD177 Gens wurden insgesamt 12 DNA Proben untersucht, von denen 8 mit CD177 negativem Phänotyp und 4 mit CD177 positivem Phänotyp assoziiert waren. Es wurde eine bisher nicht bekannte genetische Variante (c.1291G>A) bei den CD177 negativen Spendern gefunden, die durch Disruption [...]