Durchflusszytometrische Analysen zur Expression des Hitzeschockproteins Hsp70 auf der Zelloberfläche von kolorektalen Primärtumoren und hepatischen Metastasen, Magenkarzinomen, Bronchialkarzinomen, Kopf-Hals-Tumoren und akuten myeloischen Leukämien

Markus Hantschel
2005
Die Präsenz des Hitzeschockproteins 70 kDa (Hsp70) auf der Zelloberfläche humaner Tumorzelllinien geht einher mit der Erkennung durch natürliche Killerzellen (NK-Zellen) und einer antitumoralen Immunantwort (Multhoff et al., 1995; 1997). Die vorliegende Arbeit hatte zum Ziel, die klinische Relevanz der Expression des Hitzeschockproteins 70 kDa (Hsp70) als oberflächenständigen Marker für maligne Tumore und der akuten myeloischen Leukämie zu ermitteln. Die Präparation von vitalen Einzelzellen mit
more » ... intakter Zellmembran aus soliden Gewebebiopsien musste evaluiert werden. Diese Zellen konnten durchflusszytometrisch als propidiumiodid-negative Fraktion dargestellt und quantifiziert werden. Die makroskopische Konsistenz des Tumors beeinflusste die Vitalzellzahl nach manueller, nicht-enzymatischer Disaggregation: Entitätenübergreifend konnten aus medullären Karzinomen höhere Anteile an vitalen Zellen isoliert werden als aus einfachen bzw. szirrhösen Karzinomen. Als Positivkontrolle für die immunphänotypische Bestimmung von Oberflächenantigenen diente die Detektion von MHC Klasse I Molekülen mit Hilfe des Antikörpers W6/32, welche unabhängig von der Gewebekonsistenz dargestellt werden konnte. Tumorinfiltrierende Leukozyten wurden durchflusszytometrisch über das leukozytäre Oberflächenantigen CD45 identifiziert und waren bei allen untersuchten Karzinomarten nachweisbar. Die immunphänotypische Analyse mit dem bindegewebespezifischen Antikörper AS02 ergab die höchsten Anteile AS02-positiver Zellen bei szirrhösen Karzinomen gegenüber einfachen und medullären Karzinomen. Membranständiges Hsp70 wurde mit Hilfe des Hsp70-spezifischen Antikörpers cmHsp70.1 analysiert. Mehrfachfärbungen konnten Hsp70-positive Zellen aus den malignen Gewebebiopsien als distinkte Population gegenüber CD45-positiven Leukozyten unterscheiden. Hsp70-positive Einzelzellen konnten so bei kolorektalen Karzinomen, hepatischen Metastasen, Magenkarzinomen, Bronchialkarzinomen und Kopf-Hals-Tumoren nachgewiesen werden. Bei akuten myeloischen Leukämien wurde du [...]
doi:10.5283/epub.10249 fatcat:lzonvg62rbcetkkcg6lo5okeci