A baculovirus expression vector system (BEVS) is used routinely to produce recombinant proteins in the milligram scale. Dual Ig domain containing cell adhesion molecule (DICAM) belongs to the type I class of transmembrane proteins. It consists of a signal peptide, two V-type Ig domains in the extracellular region, and a short cytoplasmic tail of 442 amino acids. To purify the recombinant DICAM protein from cells overexpressing the mouse full-length DICAM gene, recombinant baculovirus is

more »

... and recovered in the Sf9 cells. As a result, mouse DICAM protein was efficiently expressed and extracted from the insect cells using the BEVS. This recombinant protein can be used in further studies for functional test of DICAM protein in the cells. Key Words: Baculovirus expression vector system, Dual Ig domain containing cell adhesion molecule, Recombinant protein 서 론 유전자 재조합 베큘로 바이러스 시스템 (baculovirus expression vector system; BEVS)은 곤충세포에서 특이적 으로 외래 유전자를 발현하기 위해 광범위하게 이용되 는 단백질 발현 체계로서 Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (AcNPV)로 부터 유래된 곤충 특이적 바이러스를 사용한다 (1, 2). BEVS는 동물세포를 이용한 단백질 발현 체계보다 더 많은 양의 단백질을 생산할 수 있고, 대장균을 이용한 발현 체계보다 고품질의 목적하 는 단백질 생산 가능성이 더욱 큰 것이 장점으로 알려져 있다 (1, 3). 최근 보고에 따르면, BEVS는 동물세포에서 증식하는 바이러스 벡터 (아데노와 레트로 바이러스 등) 에 비하여 곤충세포에서만 특이적으로 발현 및 증식이 가능하다는 이유 때문에 유전자 치료 등 여러 다양한 목적으로 응용이 가능한 것으로 인정을 받고 있다 (4, 5). AcNPV는 약 130 kb의 환형 이중나선의 DNA를 게놈으 로 가지기 때문에 다른 바이러스 벡터와 비교하여 상당 히 큰 외부 유전자 (12 kb 이상)를 바이러스 게놈 내로 도입 가능한 것이 큰 장점으로 알려져 있다 (6). 이러한 이유 때문에 BEVS는 여러 종류의 재조합 단백질을 생산 하기 위한 발현 체계로서 이용되고 있으며 향후 적용 범 위 역시 증대될 것으로 생각된다. CTX 단백질 그룹에 속하는 dual Ig domain containing cell adhesion molecule (DICAM)은 type I 막관통 특성을 가지며, 세포외 기질에 두 개의 V-type Ig 부위와 세포 내 로 짧은 꼬리 부위를 가지는 세포막 단백질 구조를 가지