Der Einfluß von verschiedenartigen Substraten auf die α-Amylase-Heterogenitätsbestimmung

J. KAMARÝT
1968 Clinical Chemistry and Laboratory Medicine  
Die Substrat-Qualität beeinflußt bei der Bestimmung von Isoamylasen die Anzahl der ermittelten Fraktionen nicht. Die Höhe der Aktivitäten wird nach der Entwicklung der enzymatischen Reaktion mit verschiedenen Substraten in übereinstimmenden Relationen erfaßt. Bei der Verwendung hydrolysierter Stärke als Substrat ergeben sich die Isoenzymfraktionen als scharfe Banden, welche gut auswertbar und für die Photodokumentation geeignet sind. Es ist anzunehmen, daß der Nachweis mit nativer Stärke
more » ... licher als mit hydrolysierter ist. Die Banden liegen dicht beieinander. Die Photodokumentation kann am selben Tage durchgeführt werden. Der Nachweis mit nativer Stärke ermöglicht eine einfache visuelle Differenzierung der unechten amylolytischen Zonen. Leber-Glykogen als Substrat ist sehr kostspielig und die Ergebnisse stimmen mit denen überein, welche mit Stärke erhalten werden. Die Versuche zeigen, daß die Amylase-Heterogenitäts-Bestimmung, deren Bedeutung für die Genetik und Diagnostik schon heute unbestreitbar ist, durch die Verwendung verschiedener Substrate mit geringeren Fehlern belastet ist als die Gesamt-Aktivitätsbestimmung dieses Enzyms. Die Verwendung verschiedener Substrate ermöglicht eine besonders sichere Auswertung der echten Isoamylasen. In the determination of isoamylases, the substrate used does not influence the number of recorded isoenzymes. The relative intensities of activity of each isoenzyme fraction are also the same with different substrates. When hydrolysed starch is used as the substrate, the isoenzyme fractions appear as sharp bands, which are easily evaluated and suitable for photodocumentation. The detection is more sensitive with native than with hydrolysed starch. The bands are close together. The separation can be photographed on the same day. By using native starch, the spurious amylolytic zones can be detected visually. Liver glycogen is very expensive and the results agree with those obtained with starch, By using different substrates, amylase heterogeneity, which is nowdays undoubtedly important for genetics and diagnosis, can be determined with less error than in the measurement of total activity of the enzyme. The use of different substrates is especially suitable for detecting and evaluating the true isoamylases.
doi:10.1515/cclm.1968.6.2.96 fatcat:3uoea7l2bna7zfyenzp23uznjm