Generación de embriones bovinos por inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) utilizando espermatozoides tratados con agentes desestabilizadores de membrana
Spanish

Fabiola Zambrano
2015 SPERMOVA  
RESUMEN La ICSI en bovinos tiene baja eficiencia debido en parte a la presencia del acrosoma y a la exposición tardía del factor espermático (PLCζ). El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la eliminación del acrosoma y membranas plasmáticas de los espermatozoides con lisolecitina (LL) y tritón X100 (TX) sobre la fertilización y desarrollo de embriones generados por ICSI. Se evaluó la acrosina y PLCζ por inmunofluorescencia y citometría de flujo, el desarrollo embrionario por lupa
more » ... rionario por lupa estereoscópica y la formación pronuclear por microscopía fluorescente. Los resultados mostraron que LL y TX disminuyeron el número de espermatozoides con acrosina (77-95% y 80-98%, respectivamente) respecto al control (7%). De igual forma, LL y TX disminuyeron (p<0,05) el número de espermatozoides con PLCζ. La tasa de división fue mayor en ICSI-TX (66%) mientras que la tasa de blastocistos fue mayor en ICSI-LL (28,5%) con respecto al control. No se observaron diferencias en la tasa de fertilización entre los tratamientos. En conclusión, el pretratamiento de espermatozoides con LL aumenta significativamente la tasa de desarrollo de embriones ICSI. ABSTRACT ICSI in cattle has low efficiency due to the presence of intact acrosome and delayed exposure of the spermatic factor (PLCζ). The aim of the present study was to evaluate the effect of the removal of the acrosome treating the spermatozoa with lysolecithin (LL) and triton X100 (TX) on the embryonic development and fertilization of embryos generated by ICSI. PLCζ and acrosin were evaluated by inmunofluorescencia and flow cytometry. Embryonic development was determined with stereomicroscope and pronuclear formation by epifluorescence microscopy. The results showed that LL and TX reduced the number of sperm with acrosin (77-
doi:10.18548/aspe/0002.34 fatcat:4son7tutqnesnizsaa75dbthey