Isolamento e caracterização de bactérias degradadoras de acefato [thesis]

Karina Paschoal Góes
2009 RESUMO GÓES, K. P. Isolamento e caracterização de bactérias degradadoras de acefato. 180 f. Tese (Doutorado em Microbiologia) -Programa de Pós-Graduação, Departamento de Microbiologia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2009. Quatro linhagens capazes de crescer com acefato foram isoladas a partir de solos agrícolas com históricos de aplicação de deste composto. Stenotrophomonas maltophilia, Rhodococcus sp, Staphylococcus sp e Pandoreae sp foram identificadas através da análise do rDNA
more » ... a análise do rDNA 16S e perfil de ácidos graxos de membrana. O protocolo analítico para determinação de acefato e metamidofós em meio de cultura baseado na extração com acetato de etila e sulfato de sódio seguido da análise por GC/MS foi desenvolvido e validado. Rhodococcus sp foi o isolado mais eficiente na degradação de acefato, removendo 99.24% deste composto em meio de cultura com acefato como única fonte de carbono, seguido da acumulação e degradação de metamidofós. Quando avaliados com acefato como fonte combinada de carbono e nitrogênio, estes organismos degradaram 19% de acefato com formação de 17% de metamidofós. Staphylococcus sp apresentou 21% de degradação de acefato utilizando-o como fonte de carbono e nitrogênio, mas não manteve o crescimento quando em presença deste composto como fonte de carbono. Stenotrophomonas maltophilia e Pandoreae sp não mantiveram a capacidade de crescer com acefato como única fonte de carbono isoladamente. Estas linhagens apresentaram crescimento em acefato como fonte de nitrogênio e enxofre, porém, as análises de GC/MS demonstraram que não houve degradação nestas condições. Palavras-chave: Acefato. Biodegradação. GC/MS. Organofosforado. ABSTRACT GÓES, K. P. Isolation and Characterization of Acephate degrading bacteria. 180 p. Tese (Doutorado em Microbiologia) -Programa de Pós-Graduação, Departamento de Microbiologia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2009. Four strains of microorganisms capable of growth on acephate were isolated from agricultural soil samples with a history of acephate application. Stenotrophomonas maltophilia, Rhodococcus sp, Staphylococcus sp and Pandoreae sp were identified based on 16S rRNA gene sequencing and fatty acid profiling. An analytical protocol for acephate and metamidophos determination in growth media based on liquid-liquid extraction with ethylacetate and sodium sulphate and subsequent analysis by GC/MS was developed and validated. Rhodococcus sp was the most efficient acephate degrader of the isolates, it removed 99.24% of acephate from defined growth media when the compound was provided as sole carbon source, whith transient accumulation of metamidophos. When provided as a combined carbon and nitrogen source, the organisms degraded 19% of acephate with formation of metamidophos (17%). Staphylococcus sp degraded 21% of acephate when provided as sole nitrogen and carbon source but did not grow on the compound as a sole source of carbon. Pandoreae sp and Stenotrophomonas maltophilia failed to grow on acephate as sole source of carbon after three successive subcultivations in defined medium. These strains grew in media where the pesticide was provided as a combined nitrogen and carbon source, but no acephate biodegradation could be demonstrated in these instances.
doi:10.11606/t.42.2009.tde-28102009-123936 fatcat:x5rp5j46ovhnpczw4nhz3csnea