утворення полівидовоЇ Біоплівки МолочнокислиМи БактеріяМи laCToBaCillus PlaNTaruM р17630 та дріЖдЖоподіБниМи гриБаМи САNDiDА АlBiСАNs атсс 18804 Мета. Вивчення взаємодії клітин lactobacillus plantarum Р17630 та Candida аlbiсаns АТСС 18804 при утворенні полівидової біоплівки та встановлення основних етапів її формування. Методи. Взаємодію клітин lactobacillus рlantarum Р17630 та Саndidа аlbiсапs АТСС 18804 при утворенні монота полівидової біоплівок вивчали за культивування у живильних

more »

... Mrs і Сабуро. Структуру біоплівок та наявність окремих структурних складових, які визначають ступінь зрілості мікробних асоціацій, визначали за забарвленням кристалічним фіолетовим. Реєстрацію взаємовідносин впродовж формування полівидової біоплівки здійснювали шляхом порівняння показників її оптичної щільності з показниками монобіоплівок l. plantаrum Р17630 та C. albicans АТСС 18804. Результати. Найбільш інтенсивне утворення монобіоплівки окремими штамами l. plantarum Р17630 та С. аlbiсапs АТСС 18804 відбувалося впродовж перших двох діб культивування у рідкому живильному середовищі Сабуро. Під час утворення полівидової біоплівки між l. plantarum Р17630 та С. аlbiсапs АТСС 18804 розвивалася антагоністична взаємодія, найбільший прояв якої спостерігався впродовж перших 48 год культивування, визначаючи порушення структурних компонентів біоплівки. Висновки. В процесі формування моновидових біоплівок було визначено три основних етапи: адгезія клітин до щільної поверхні (перші 24 год), утворення окремих мікроколоній (впродовж другої доби) та формування зрілого суцільного клітинного шару (за 96 год інкубації). Антагоністична взаємодія l. plantarum Р17630 та С. аlbiсапs АТСС 18804 у складі полівидової біоплівки, зокрема уповільнення розвитку дріжджоподібних грибів та утворення ними суцільного міцелію, була більш вираженою при утворенні еукаріотним учасником угруповання гіфів, ніж окремих дріжджоподібних клітин. Ключові сл ова: полівидова біоплівка, lactobacillus plantarum, Candida albicans, антагонізм. У протилежність суспензії (планктону), біоплівка, тобто прикріплена форма існування мікроорганізмів, є поширеною у природних умовах [4]. Мікроорганізми in vivo, існуючи на межі розділу фаз, вступають у контакт з біотичною або абіотичною поверхнею, формують специфічні угруповання, а останнім часом підвищується інтерес до вивчення можливих варіантів взаємодії учасників формування біоплівки, молекул, що опосередковують її та форми впливу на відповідні процеси. Доведено, що у переважної кількості досліджень з полівидовими біоплівками саме антагонізм є основою мікробної взаємодії, яка, очевидно є набагато складнішою, ніж досі вважалося [9]. Крім мікробних, існують також й інші чинники, у тому числі хімічної природи, з якими мікроби стикаються у довкіллі. Наприклад, склад живильного середовища, концентрація кисню, заліза та інших необхідних компонентів, які можуть мати значний вплив на розподіл біомаси та розвиток мікробних асоціацій [14] . Ці фактори можуть модулювати, а іноді значно змінювати взаємодію між різними видами мікроорганізмів біоплівки. Молочнокислі бактерії є досить різноманітною групою мікроорганізмів, представників яких можна зустріти не тільки у складі мікробіоти людини та тварин, а й у інших екологічних нішах [2]. lactobacillus plantarum Р 17630, виділений з піхви здорової жінки штам молочнокислих бактерій, є одним з небагатьох штамів лактобацил з підвищеною здатністю до адгезії, стійких до антибіотиків, що широко застосовуються у терапії кандидозів статевої системи жінок [5]. Колонізуючи відповідні біотопи та утворюючи на щільній поверхні біоплівку, клітини l. plantarum Р 17630 вступають у взаємодію з іншими мікроорганізмами, зокрема Саndidа аlbiсапs, виявляючи антагоністичні властивості. Але дотепер ще невідомо особливості взаємодії учасників полівидового мікробного угруповання [3]. Метою даної роботи було вивчення взаємодії клітин lactobacillus plantarum Р 17630 та Candida аlbiсаns АТСС 18804 при утворенні полівидової біоплівки та встановлення основних етапів її формування. Матеріали та методи дослідження В роботі було використано штами lactobacillus рlantarum Р17630, виділений з препарату «Гінолакт» (Каталент Італі С.п.А., Італія), та Саndidа аlbiсапs АТСС 18804, отриманий з музею культур мікроорганізмів кафедри мікробіології, вірусології та біотехнології ОНУ імені І.І. Мечникова. Для культивування використовували живильні середовища: MRS (стандартне живильне середовище для культивування лактобацил), рідкий варіант Сабуро (застосовується для культивування дріджподібних грибів та кислотолюбивих бактерій) та модифікований варіант останнього (зі зменшеною концентрацією глюкози (12,5 г/л) та додаванням L-проліну (0,5 г/л)) [1, 12] . В усіх експериментах попередню підготовку добових культур мікроорганізмів здійснювали згідно з методиками [3, 11]. Робочі суспензії клітин l. plantаrum Р17630 та С. albicans АТСС 18804 містили по 5×10 6 КУО/мл. Для отримання змішаної біоплівки з відповідних суспензій готували суміш,