Ao meu orientador Prof. Dr. Luiz Gonzaga Tone, quem me deu a oportunidade de crescer como pessoa e como profissional, me recebendo como orientando e colaborando intensamente com o meu desenvolvimento científico e intelectual durante todo esse tempo. À Dra. Maria Sol Brassesco Annichini pela paciência, apoio e profissionalismo demonstrado em todo este tempo de formação acadêmica e de bancada. À Dra. Rosane Gomes Queiroz pelo apoio, disponibilidade e sugestões importantes no desenvolvimento dos

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... us experimentos. À Prof. Dra. Nilce Martinez Rossi, chefe do Departamento de Genética da FMRP/USP, pela atenção e apoios despendidos. Ao Prof. Dr. Ademilson Espencer Egea Soares, coordenador da Pós-graduação do Departamento de Genética da FMRP/USP pelo apoio e exemplo de entrega constante. À Prof. Dra. Lucia Regina Martelli, pelo apoio e preocupação constante durante a minha formação. Aos membros da banca examinadora, pela disponibilidade e paciência em analisar este trabalho, enriquecendo-o com as suas críticas e sugestões. local de realização de todos os meus experimentos. Aos pacientes e seus familiares pela doação do material utilizado nesse trabalho. Ao Prof. Dr. Elvis Terci Valera, pela sua contribuição e disposição constante, assim como também pela sua experiência transmitida. v Ao Prof Dr. Carlos Scrideli pelo seu apoio, confiança e disposição. Ao Prof. Dr. Luciano Neder Serafini e Sra. Maria Paula Scandar pela colaboração na caracterização patológica das amostras. À Prof. Dra. Silvia Regina Rogatto pela sua valiosa contribuição para o estabelecimento da metodologia de CGH em nosso laboratório. As funcionarias e amigas do laboratório de Citogenética-HC, Sonia Aparecida Scandiussi, Aide Barbosa dos Santos, Lucimar Laureano e Maria Lucia Machado, pelo carinho, amizade e bom convívio, sempre prestas a ajudar. Ao MSc. Daniel Moreno, pela verdadeira e fraterna amizade demonstrada desde que iniciamos a juntos a pós-graduação. Ao Biomédico Kleiton Borges, pela amizade sincera e profissionalismo demonstrado diariamente. À Dra. Fabiana Valera pelo seu apoio e simpatia demonstrada. Ao Dr. Fabio Morato pelo apoio e colaboração desde o inicio do meu mestrado. Ao Prof. Dr. Fabio Motta, pela amizade, apoio e determinação, muito obrigado amigo. Á Prof. Dra. Renata Canalle pela amizade, simpatia e colaboração. Aos colegas pós-graduandos do laboratório de Oncologia Pediátrica: Maria Angélica, Vanessa, Karina e Thales. E também aos amigos com quem compartilhe bons momentos de convívio: Priscilla e Livia . Aos que ajudaram que meu trabalho seja menos difícil com o uso de equipamentos, Ana Silvia e Marli do serviço de Hematologia-HC. Às secretarias Aparecida Helena, Evelice Visconte, Susie Nalon e Maria Aparecida, pela presteza em ajudar sempre. À instituição CAPES pelo apoio financeiro. vi À instituição FAEPA pelo apoio financeiro. Aos meus pais Jorge e Maria Elena, pelo amor, formação e valores que ensinaram para mim. Á Angela, minha companheira de sempre, pelo amor, confiança e apoio incondicional. A todas as pessoas que de alguma maneira contribuíram para a realização deste trabalho vii "O mais importante da vida não é a situação em que estamos, mas a direção para a qual nos movemos" Oliver W. Holmes viii x ABSTRACT CASTRO-GAMERO, AM. Chromosomal Imbalances in nine cases of Osteosarcoma detected by Comparative Genome Hybridization (CGH); 2008, 129p. Dissertation (Master Degree) Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2008. Osteosarcoma (OS) is the most frequent aggressive bone malignancy affecting children and young adults with an event-free survival of 50-70% after 3 years. The incidence peak occurs during the second decade of life, suggesting a relationship between rapid bone growth and the development of this tumor. The knowledge of the genetic basis behind tumor progression is still limited. Conventional cytogenetic studies have demonstrated that OS exhibits high cariotipic heterogeneity, with different degrees of aneuploidy and complex structural rearrangements. The CGH is an important tool for studying the genomic profiles of solid tumors, and has confirmed the complexity of cariotipic alterations in OS. However, previous studies have shown divergent results and few have correlated them with tumor progression. The objective of present study was to identify chromosome unbalances in nine samples of OS by CGH. 3 biopsies, 5 resections before quimioterapy and 1 metastasis were analyzed. The experiments were performed accordingly with Kallioniemi et al (1994). CGH detected chromosomal imbalances in all samples. Gains were more frequent than losses. Many chromosomal alterations were observed, especially gains at 1q, xi 2 , 3p, 4, 5p, 6, 7, 8, 11p, 14q, 16, 21q and X; and losses at 1p, 2q, 3q, 5q, 9q, 11q and 17q. The minimal regions of superposition were gains of 2p13-p14, 2q36-q37, 4q21 and 8p22, and losses of 1p43.2, 3q22-q23 and 3q24. Three patients had consecutive samples, and the chromosomal alterations varied, reflecting the chromosomal heterogeneity for each case. The highest clonal divergence among the consecutive samples was observed between resection and the corresponding metastatic sample, showing the chromosomal complexity acquired during the progression and dissemination in this case. Additional investigations for the characterization of genes at these regions are necessary.