Entwicklung eines auf nativen Membranen basierenden Untersuchungssystems für das Endoplasmatische Retikulum [article]

Mona Grimmer, Universitäts- Und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt, Martin-Luther Universität, Kirsten Bacia, Claudia Steinem
2020
Das Endoplasmatische Retikulum (ER) erfüllt zahlreiche Funktionen in eukaryotischen Zellen. Da es im Inneren der Zelle liegt und eine komplizierte und dynamische Struktur aufweist, ist es für viele biophysikalische Methoden, die Struktur- und Funktionsinformationen liefern, schwer zugänglich. Giant unilamellar vesicles (GUVs) hingegen sind für mehrere Methoden geeigneter. Daher war es das Ziel dieser Arbeit, die Herstellung von GUVs aus dem ER zu etablieren. Hierzu wurde das Fusionsprotein
more » ... in ER-Membranen von Hefezellen angereichert. Die ER-Membranen wurden isoliert, ihre Reinheit mit Markerprotein-basierten und massenspektrometrischen Methoden analysiert und anschließend GTP-abhängig zu sehr großen Vesikeln fusioniert, den giant ER vesicles (GERVs). Die Anwendbarkeit der GERVs wurde im Rahmen von Immunfluoreszenzfärbungen, Membranproteineinbau, Fluoreszenzkorrelationsspektroskopie sowie kryo-elektronenmikroskopischen Aufnahmen von verformten Membranen unter Beweis gestellt.
doi:10.25673/34927 fatcat:4skpvcupnbblroksf3zzy6kvoq