Atividade anti-tumoral e imunomodulatória de complexos de paládio (II) utilizando modelo experimental de Ehrlich [thesis]

Marcela Bassi Quilles
você me deu o caminho. Dedico a você, Mãe, que se deu por inteiro, e renunciou aos seus sonhos para que muitas vezes, pudesse realizar os meus, não bastaria um muito obrigado. A você mãe por natureza, opção e amor, venho de alguma forma traduzir esta emoção que palavras dificilmente traduzem. Obrigado por acreditar e apoiar minhas decisões, pelo amor, silêncio, compreensão oferecidos. Amo você.... Agradecimentos A Deus, que desde o início dessa caminhada, Tu estavas presente. Vitórias foram
more » ... uistadas. Derrotas foram superadas. Amizades foram criadas. Conhecimentos foram adquiridos. ....e agora que alcancei meu objetivo, venho lhe agradecer humildemente a vitória desse momento. Obrigada Senhor ! Ao meu amado esposo, que sempre esteve ao meu lado. Te amo e te agradeço pelo seu apoio quando mais precisei de sua paciência, compreensão, atenção e amor. Esta conquista sem dúvida é sua também. Obrigada por tudo!!! A minha Querida orientadora Iracilda Zeppone Carlos, por ter me iniciado na pesquisa a ser uma profissional responsável e dedicada. Pela confiança depositada e pela paciência dispensada. Devo muito do que sou hoje a você!Obrigada por ter me ensinado sobre ciência e sobre a vida! Aos colegas de trabalho que fizeram os momentos difíceis mais agradáveis com palavras de conforto e ânimo, e por toda ajuda para término deste trabalho. As minhas amigas "Cabeças" pela descontração e por toda a amizade durante os anos de convivência, não sei o que seria sem vocês! A Marisa Campos Polesi Placeres por toda a ajuda e amizade, Adoro você Má. Ao Institudo de Química pela ajuda e compreensão. Ao Antônio Carlos Moro e Sandra Regina Ananias pela grande ajuda, paciência e pelo fornecimento dos materiais dos compostos estudados. As Profs. Eliana Aparecida Varanda e Clarice Queico por ter aberto as porta de seu laboratório, e a sua equipe, Flavinha, Ana, Mari, Fabiana, Adolfo, Fernando, que sempre estiveram solícitos a ajudar, muito obrigada. Ao Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) pela bolsa concedida. RESUMO O câncer, manifestação originada pelo crescimento descontrolado de células, afeta milhões de indivíduos. Os macrófagos são as primeiras células a serem ativadas para participar de uma resposta imunológica propriamente dita, são células capazes de secretar mais de cem produtos biologicamente ativos, entre esses, espécies reativas de nitrogênio e citocinas que atuam no contexto da resposta imunológica e/ou inflamatória. Sabendo que compostos de paládio (II) podem apresentar potenciais atividades antitumorais, neste trabalho foram testado os compostos de fórmula geral [Pd(dmba)(Cl)tu] e [Pd(dmba)(N 3 )tu], nos quais dmba = N,N-dimetilbenzilamina e tu = tiouréia quanto a atividade antiinflamatória, antitumoral e mutagênica dos mesmos.Como droga padrão das reações realizadas foi utilizada a cis-platina. Foi determinada a ação destes compostos frente ao sistema imunológico através, de ensaios de determinação de citotoxicidade mediano (IC 50 ) pela técnica de MTT, óxido nítrico (NO), peróxido de hidrogênio (H2O2), determinação das citocinas IL-1, IL-6, IL-12, TNF-α e IL-10. Além disso, foi determinado a atividade antitumoral dos compostos frente à célula tumoral de Ehrlich, assim como a atividade mutagênica pelo teste de Ames e Ensaio com plasmídio pUC 9.1. Os resultados mostraram produção de NO e das citocinas IL-1, IL-6, IL-12 e TNF-α; moderada produção de H 2 O 2 pelos macrófagos peritoneais de animais normais e animais portadores do tumor de Ehrlich na sua forma sólida, estimulados com os compostos e seus ligantes, assim como a cis-platina. Por outro lado, de maneira contrária às outras citocinas testadas, não houve a produção de IL-10. No que se refere à atividade antitumoral dos compostos testados, estes mostraram efeito citotóxico sobre a linhagen tumoral testada. Com relação à atividade mutagênica, os compostos e ligantes não foram mutagênicos in vitro, diferente da cis-platina que demontrou-se mutagênica, ocasionando mutações pontuais no DNA de Salmonella typhimurium, pelo teste de Ames. Os compostos e ligantes também não foram capazes de induzir quebras no DNA pelo ensaio com plasmídio pUC 9.1. Levando em consideração a não mutagenicidade dos compostos e de seus ligantes, assim como a capacidade dos mesmos de estimularem a produção de citocinas pró-inflamatórias em animais portadores do tumor de Ehlich, estes demonstram-se promissores uma vez que mesmo sendo capaz de estimular o sistema imune não provoca toxicidade e mutagenicidade ao DNA. Palavras-chaves: Macrófagos, Interleucinas, Óxido nítrico, Tumor de Erlich, Organometálicos e Mutagenicidade. ABSTRACT The cancer, manifestation originated by the growth not controlled of cells, affects million of individuals. Macrophages are the first cells to be activated to participate in an immune response itself, are cells to able to secreting more than one hundred biologically active products, among these, reactive nitrogen species and cytokines that act in the context of the immune response and / or inflammatory. Knowing that compounds of palladium (II) can be potential activities anti -tumor in this study was tested compounds of general formula [Pd (Pd) (Cl) tu] and [Pd (Pd) (N 3 ) tu], where Pd = N, Ndimetilbenzilamina and tu = thiourea as the anti-inflammatory, antitumor and mutagenic of the same. As standard was used the cis-platinum. We determining the action of these compounds against the immune system, for tests to determine the median cytotoxicity (IC 50 ) by the MTT technique, nitric oxide (NO), hydrogen peroxide (H 2 O 2 ), determination of IL-1, IL-6 , IL-12, TNF-α and IL-10. Moreover, it was determined the antitumor activity of compounds against the Ehrlich tumor cell, as well as mutagenic by the Ames test and test with plasmid pUC 9.1. The results showed NO production and the IL-1, IL-6, IL-12 and TNF-α, by peritoneal macrophages from normal animals and animals with Ehrlich tumor in solid form was stimulated by the compounds and their ligands as well as cis-platinum. Moreover, in contrary manner to other cytokines tested, there wasn't production of IL-10, and H 2 O 2 . With regard to the antitumor activity of the compounds tested, these showed cytotoxic effect on tumor lineage tested. With respect to mutagenic activity, compounds and ligands weren't mutagenic in vitro, unlike cisplatinum was shown to be mutagenic, causing mutations in the DNA of Salmonella typhimurium by the Ames test. The compounds and ligants were not also to induce DNA breaks in the plasmid pUC 9.1 test. Taking into account the non-mutagenicity of compounds and their ligands, as well as of their capacity to stimulate the production of proinflammatory cytokines in animals with tumor Ehrlich, they show themselves to be promising when compared with cis-Pt, as that even being able to stimulate the immune system no causes toxicity and mutagenicity in DNA.
doi:10.5016/dt000606808 fatcat:gd2ljie4lrfpbk7m45dzz7364m